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HIPERTENSIÓN / 2016 / VOL. 21
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15) La autofagia inducida por TNF-
α
regula el cambio de feno-
tipo de las células de musculo liso vascular
Norambuena-Soto I
1
, Garcia-Miguel M
1
, Mondaca-Ruff D
1
, Car-
tes-Saavedra B
1
, Morales P E
1
, Núñez-Soto C
1
, Sanhueza-Oli-
vares F
1
, Riquelme J
1
, Mellado R
1
, Chiong M
1
,
1
ACCDiS, Departa-
mento de Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Ciencias
Químicas y Farmacéuticas, Universidad de Chile.
La desdiferenciación de las células de musculo liso vascular
(CMLV) desde un fenotipo contráctil a uno proliferativo y migra-
torio es un paso importante en la progresión de las enfermeda-
des cardiovasculares, específicamente en aterosclerosis. Esta es
una enfermedad que cursa con un componente inflamatorio cró-
nico que cuenta con la presencia del factor de necrosis tumoral a
(TNF-
α
) en la placa aterosclerótica. Además, se ha observado que
las CMLV en la placa aterosclerótica presentan un aumento de la
autofagia, un mecanismo de degradación de organelos y proteí-
nas. Sin embargo, se desconoce si TNF-
α
es capaz de producir
la desdiferenciación de las CMLV, y si es necesaria la autofagia
para este cambio de fenotipo. Se estimularon CMLV de aorta de
rata, células A7r5, con TNF-
α
100 nM. TNF-
α
indujo autofagia
determinado por un incremento de los niveles de LC3-II y dismi-
nución de p62 desde las 24 h de tratamiento. TNF-
α
indujo des-
diferenciación de las CMLV, determinado por una disminución de
proteínas contráctiles
α
-SMA y SM22 y un aumento de proteínas
de matriz extracelular (MEC) osteopontina y colágeno. Además,
TNF-
α
indujo proliferación de las CMLV evaluado por incorpora-
ción de [
3
H]-Timidina y ensayo de MTT, y migración, mediante
ensayo de herida y de Transwell. Por último, cuando se inhibió
la autofagia usando un siRNA para Beclin1, la desdiferenciación
de las CMLV inducida por TNF-
α
se inhibió. En este estudio se
mostró que TNF-
α
induce la desdiferenciación de las CMLV de
una forma dependiente de autofagia.
Fondecyt 1140329, FONDAP 15130011
16) Un alto consumo de sal afecta la expresión de microRNA
asociado a la expresión de HSD11B2 en población pediátrica
Tapia-Castillo A
1
, Lizama J
2
, Valdivia C
2
, Ortiz D
2
, Campino C
2
,
Allende F
3
, Solari S
3
, García H
4
, Martínez-Aguayo A
4
, Vecchiola
A
2
, Repetto G
1
, Baudrand R
2
, Fardella C
2
, Carvajal C
2
,
1
Genética y
Genómica, Medicina, Universidad Del Desarrollo.
2
ENDOCRINO-
LOGIA, MEDICINA, Pontificia Universidad Católica De Chile.
3
Ser-
vicio de Laboratorios Clínicos, MEDICINA, Pontificia Universidad
Católica De Chile.
4
PEDIATRÍA, MEDICINA, Pontificia Universidad
Católica De Chile. (Sponsored by Cristian Andres Carvajal Maldo-
nado)
Estudios previos indican que una alta ingesta de sal en sujetos
con déficit parcial de la enzima 11
β
-hidroxisteroide deshidroge-
nasa tipo 2 (HSD11B2) inducen una activación no regulada del
receptor de mineralocorticoides por glucocorticoide y responden
con un aumento en la presión arterial (PA). El déficit parcial de
11
β
-HSD2 podría ser regulado negativamente por microRNAs.
La expresión de tales microRNA puede ser evaluada en exoso-
mas urinarios, los cuales son nanovesículas de membrana libera-
das para comunicación celular y que podrían dar cuenta del esta-
do fisiológico de las células de origen.
Objetivo
: Evaluar si la alta
ingesta de sal se asocia con la expresión de microRNA blancos
de 11
β
HSD2 en exosomas urinarios y determinar su asociación
con variables bioquímicas en sujetos pediátricos.
Sujetos y Mé-
todos
: Se estudiaron 51 niños (promedio de edad 13 años). Se
realizó una encuesta alimentaria para determinar el consumo de
Na/día. Se calculó el índice de PA sistólica y diastólica (iPAS&i-
PAD) usando PA observada/percentil 50 según sexo, edad y ta-
lla. Se determinó en sangre cortisol, cortisona, aldosterona, ac-
tividad de renina plasmática. Se aisló exosomas y su contenido
RNA en orina matinal. Se identificaron 4 microRNA (miR-488/
miR-615/miR-1205/miR-494) con capacidad de unión al 3’UTR
del gen HSD11B2 y se evaluó su expresión mediante ensayos
Taqman-qPCR. Las asociaciones se analizaron por rho de spe-
arman (p<0,05).
Resultados:
De los 4 microRNA estudiados solo
la expresión del miR-1205 se asoció positivamente con una alta
ingesta de sodio (Rho=0,4; p=0,03), iPAS (Rho=0,39; p=0,05),
cortisol sérico (Rho=0,49; p=0,01) y razón cortisol/cortisona
(Rho=0,55; p=0,03). miR-1205 se asocio negativamente con al-
dosterona sérica (Rho=-0,41;p=0,04). No observamos asociación
entre miR-1205 con cortisona.
Conclusión:
Nuestro resultados
muestran que una mayor ingesta de sal se asocia a mayor expre-
sión de miR-1205 en exosomas urinarios, junto con un aumento
de la razón cortisol/cortisona y la PA, sugiriendo que la actividad
de la 11
β
HSD2 puede verse afectada epigeneticamente por el
consumo de sal, a traves de mecanismos que involucran la ex-
presión de miRNAs específicos.
CONICYT-FONDECYT 1150437, 1160836, 1160695; CONI-
CYT-FONDEQUIP EQM150023; SOCHED 2015-10; CORFO
13CTI-21526-P1 y IMII P09/016-F (ICM).